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* 실험의 정의
피부에 기생하는 미생물에 대한 적송유의 항균효과를 알아본다.
* 실험의 방법
1. 일반적으로 미생물이 성장하기에 가장 좋은 환경은 만들어 그 환경속에
실험한다.
2. 대조군인으로 미생물만을 성장시켜 그 성장정도를 채크한다.
3. 비교군으로 미생물을 성장시키는 도중 송침유를 첨가하여 미생물의 생존량을
측정한다.
* 실험의 재료
1. 균주의 종류
Accession No.
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별칭(이명)
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학 명 |
BZ002
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KCTC2513
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Pseudomonas aeruginosa |
BZ003
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KCTC1916
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Staphylococcus aurens subsp. aurens |
BZ004
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KCTC2571
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Escherichia coli |
2. 배지의 종류
Nutrient Agar, Nutrient brouth
3. 실험의 순서 및 방법
① 균주은행에서 분양받은 균주를 Nutrient brouth를 녹인 액상배지(미생물먹이)에
접종한 후
진탕배양기에서 48시간 배양한다.
② Nutrient Agar를 패트리 디쉬에 깔아 멸균 보관한다.
③ 1에서 배양된 균주를 백금이를 이용 2의 배지에 깔아서 2일간 배양한다.
④ 3에서 배양된 균주를 Nutrient brouth를 녹인 액상배지(미생물먹이)에
접종한 후 진탕배양기에서
48시간 배양한다.
⑤ 4에서 배양된 균주를 원심분리 시킨다.(9000rpm, 15min)
⑥ 5에서 분리시킨 균주를 Nutrient brouth를 녹인 액상배지(미생물먹이)에
다시 희석 하여 원심분리
(9000rpm, 15min)
시킴을 3회 반복한다.(미생물이외의 부산물의 제거과정)
⑦ 6에서 최종적으로 분리시킨 균주를 초순수로 희석해 원심분리(9000rpm,
15min) 시킨다.
⑧ 7에서 분리된 균주를 초순수에 희석하여 Optical Density값이
0.2-0.4가 유지되도록 잡아 플레이팅
한다.
⑨ 7에서 분리된 균주를 각 1ml 취하여 멸균된 초순수 9ml이
들어있는 시험관에 넣어 희석한다.
희석된 미생물을 다시 1ml
취하여 멸균된 초순수 9ml이 들어있는 시험관에 넣어 다시 희석한다.
이 과정을 10회 걸처 시행하고
각 과정별로 페트리디쉬에 Nutrient Agar가 깔려 있는 곳에 0.2ml을
취하여 5개씩 배양 하여 35℃에
서 보관하여 미생물의 개체수를 측정한다.
⑩ 9에서 나온 개체수를 기준으로 8에서 나온 균주를 다시 페트리디쉬에
Nutrient Agar가 깔려 있는
곳에 0.2ml을 취하여 5개씩
배양 하여 비교군을 만든다. 여기에 적송유를 첨가하여 대조군을 만들고
이를 35℃에서 24시간 복관하여
미생물의 개체수를 측정한다.
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